INFORMATIONS SUR LES ANALYSES
Test de Coombs


COTATION

Direct : B 15 ; associé à la recherche d'agglutinines froides : B 30 ; indirect : B 50.


BUT

Mettre en évidence la présence d'anticorps à la surface des hématies. Il s'agit le plus souvent d'auto-anticorps caractéristiques des anémies hémolytiques auto-immunes.


PRINCIPE

La détection d'anticorps fixés à la surface des globules rouges est basée sur la nature protidique de ces anticorps.
Le test de Coombs direct consiste à mettre les globules rouges du malade en présence d'une antiglobuline polyvalente (sérum de lapin anti-immunoglobulines humaines entraînant l'agglutination, phénomène facilement détectable). En cas de positivité, la nature de l'auto-anticorps peut être déterminée en refaisant un test de Coombs avec des antiglobulines monospécifiques : anti-IgG, anti-IgM ou anticomplément. On peut quantifier en utilisant des dilutions croissantes d'antiglobuline.
La spécificité de l'auto-anticorps fixé à la surface de l'hématie pathologique peut être déterminée par le test sérique à l'antiglobuline (test de Coombs indirect) dans le sérum du malade s'il contient des anticorps libres, sinon après élution de ceux qui sont fixés à l'hématie. Le test de Coombs indirect se fait en 2 temps.
Dans un 1er temps, le sérum ou l'éluat est incubé avec des hématies-tests (panel d'hématies dont les antigènes de membrane sont connus) ; les auto-anticorps se fixent sur les hématies-tests ayant l'antigène correspondant.
Dans un 2e temps, l'adjonction d'une antiglobuline entraîne l'agglutination. Le test se fait à 37 oC et à 4 oC pour dépister des agglutinines froides. Des dilutions croissantes permettent de quantifier.


RÉALISATION PRATIQUE

Prélèvement de 10 ml de sang veineux sur tube sec et de 5 ml sur tube citraté. Si l'on suspecte, sur des manifestations cliniques survenant au froid, la présence d'agglutinines froides, le prélèvement doit être conservé à 37 oC.


RÉSULTATS

Chez le sujet normal, le test de Coombs est négatif, les hématies normales ne comportent pas à leur surface d'immunoglobulines. Il peut exister chez le sujet normal des agglutinines froides, mais leur taux doit rester inférieur ou égal à la dilution de 1/32.


CAUSES D'ERREURS

Le test de Coombs peut mettre en évidence un allo-anticorps dans les suites immédiates d'une transfusion sanguine non parfaitement compatible. Mieux vaut éviter de faire un test de Coombs à visée diagnostique dans les jours suivant une transfusion.
L'immunoglobuline fixée sur l'hématie peut être un anticorps dirigé contre un antigène lié à la surface de l'hématie, tel qu'un médicament venant d'être prescrit au malade (pénicilline, céphalotine).
Une auto-agglutination des hématies peut exister en dehors de tout anticorps, notamment au cours de dysglobulinémies ou de cryoglobulinémies.


INTERPRÉTATION ET INTÉRÊT

• Un test de Coombs direct positif caractérise les anémies hémolytiques auto-immunes. Celles-ci sont généralement dues à des autoanticorps « chauds » (actifs à 37 oC), ayant une spécificité anti-rhésus (anti-nl le plus souvent). Certains médicaments (Aldomet®, L-dopa) sont aussi susceptibles d'induire la formation d'auto-anticorps.
• Un test de Coombs de type IgM avec augmentation du taux d'agglutinines froides s'observe dans des anémies hémolytiques aiguës secondaires à des infections virales (mononucléose infectieuse, pneumonies atypiques à mycoplasmes, etc.).
• La maladie des agglutinines froides est caractérisée par une anémie hémolytique chronique avec taux extrêmement élevé d'agglutinines froides (souvent supérieur à la dilution de 1/100 000), de nature monoclonale. L'agglutinine froide est de type IgM et de spécificité anti-I, plus rarement anti-i.
• Un test de Coombs de type « complément » s'observe dans les états pathologiques sans évidence d'anémie hémolytique, notamment dans la cirrhose hépatique.
• Un test de Coombs positif, de type IgG ou mixte, avec ou sans anémie hémolytique, peut s'observer dans des maladies auto-immunes ou dans des syndromes lymphoprolifératifs.
• Le test de Coombs indirect sert aussi à détecter les agglutinines irrégulières survenant après immunisation transfusionnelle.


A.B.

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